Hoʻoulu ka Phosphorylation i ka haku hoʻoponopono ulu DELLA ma Arabidopsis ma o ka hoʻolaha ʻana i ka hui ʻana o ka histone H2A me ka chromatin.

Mālama ʻia nā protein DELLAnā mea hoʻoponopono uluhe kuleana koʻikoʻi i ka hoʻomalu ʻana i ka hoʻomohala ʻana i nā mea kanu i ka pane ʻana i nā ʻike kūloko a me ke kaiapuni. Hana ʻo DELLA ma ke ʻano he mea hoʻoponopono transcriptional a ua kiʻi ʻia i nā mea hoʻolaha e hoʻopaʻa ʻia i nā mea transcription (TFs) a me ka histone H2A ma o kāna kāʻei GRAS. Ua hōʻike ʻia nā haʻawina hou ua hoʻoponopono ʻia ka paʻa o DELLA ma hope o ka unuhi ʻana ma o ʻelua ʻano hana: polyubiquitination i hoʻokomo ʻia e ka phytohormone gibberellin, e alakaʻi ana i kona degradation wikiwiki, a me ka hoʻohui ʻana o nā mea hoʻololi e like me ubiquitin (SUMO) e hoʻonui i kona hōʻiliʻili. Eia kekahi, hoʻoponopono ikaika ʻia ka hana DELLA e ʻelua glycosylations ʻokoʻa: hoʻonui ʻia ka pilina DELLA-TF e O-fucosylation akā ua kāohi ʻia e ka hoʻololi ʻana o N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) i hoʻopili ʻia. Eia naʻe, ʻaʻole maopopo ka hana o ka DELLA phosphorylation, no ka mea, ua hōʻike nā haʻawina mua i nā hopena kū'ē, mai nā mea e hōʻike ana i ka phosphorylation e hāpai a hōʻemi paha i ka degradation DELLA i nā poʻe ʻē aʻe e hōʻike ana ʻaʻole pili ka phosphorylation i kona kūpaʻa. Maanei, ʻike mākou i nā pūnaewele phosphorylation ma REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) i hoʻomaʻemaʻe ʻia mai ka Arabidopsis thaliana e ka nānā ʻana o ka spectrometry nui a hōʻike i ka phosphorylation o ʻelua peptides RGA ma nā ʻāpana PolyS a me PolyS / T e hoʻoikaika i ka hoʻopaʻa ʻana o H2A a hoʻonui i ka hana RGA. ʻO ka hui o RGA me nā mea hoʻolaha pahuhopu. ʻO ka mea nui, ʻaʻole pili ka phosphorylation i nā pilina RGA-TF a i ʻole RGA paʻa. Hōʻike kā mākou haʻawina i ke ʻano molekala e hoʻoulu ai ka phosphorylation i ka hana DELLA.
No ka wehewehe ʻana i ke kuleana o ka phosphorylation i ka hoʻoponopono ʻana i ka hana DELLA, he mea koʻikoʻi e ʻike i nā pūnaewele phosphorylation DELLA i vivo a hana i nā loiloi hana i nā mea kanu. Ma ka hoʻomaʻemaʻe hoʻomaʻemaʻe ʻana i nā mea kanu i ukali ʻia e ka loiloi MS/MS, ua ʻike mākou i kekahi mau phosphosite ma RGA. Ma lalo o nā kūlana o ka hemahema GA, piʻi ka phosphorylation RHA, akā ʻaʻole pili ka phosphorylation i kona kūpaʻa. ʻO ka mea nui, ua hōʻike ka co-IP a me ChIP-qPCR assays i ka phosphorylation ma ka PolyS / T region o RGA e hoʻolaha i kāna pilina me H2A a me kāna hui pū me nā mea hoʻolaha pahuhopu, e hōʻike ana i ke ʻano o ka phosphorylation e hoʻoulu ai i ka hana RGA.
Hoʻopili ʻia ʻo RGA e huli i ka chromatin ma o ka launa pū ʻana o ka subdomain LHR1 me TF a laila hoʻopaʻa iā H2A ma o kāna ʻāina PolyS/T a me PFYRE subdomain, e hana ana i ka H2A-RGA-TF complex e hoʻopaʻa i ka RGA. ʻO ka Phosphorylation o Pep 2 ma ka māhele PolyS / T ma waena o ka DELLA domain a me ka GRAS domain e kahi kinase iʻikeʻoleʻia e hoʻonui i ka paʻaʻana o RGA-H2A. Hoʻopau ka protein mutant rgam2A i ka phosphorylation RGA a hoʻohana i kahi hoʻohālikelike protein ʻē aʻe e hoʻopilikia i ka paʻa ʻana o H2A. ʻO kēia ka hopena i ka destabilization o nā pilina TF-rgam2A transient a me ka dissociation o rgam2A mai ka chromatin target. Hōʻike kēia kiʻi i ka hoʻopiʻi transcriptional i hoʻopili wale ʻia e RGA. Hiki ke wehewehe ʻia kahi ʻano like no ka hoʻoulu ʻia ʻana o ka transcriptional RGA-mediated, koe wale nō ʻo ka H2A-RGA-TF complex e hāpai i ka transcription gene target a me ka dephosphorylation o rgam2A e hoʻemi i ka transcription. Hoʻololi ʻia ke kiʻi mai Huang et al.21.
Ua kālailai ʻia nā ʻikepili quantitative a pau me ka Excel, a ua hoʻoholo ʻia nā ʻokoʻa nui me ka hoʻohana ʻana i ka hōʻike t Student. ʻAʻole i hoʻohana ʻia nā ʻano helu helu no ka hoʻoholo mua ʻana i ka nui hāpana. ʻAʻohe ʻikepili i hoʻokaʻawale ʻia mai ka nānā ʻana; ʻaʻole i hoʻohālikelike ʻia ka hoʻokolohua; ʻaʻole makapō nā mea noiʻi i ka hāʻawi ʻana i ka ʻikepili i ka wā o ka hoʻokolohua a me ka loiloi o nā hopena. Hōʻike ʻia ka nui hāpana ma ka moʻolelo kiʻi a me ka waihona ʻikepili kumu.
No ka ʻike hou aku e pili ana i ka hoʻolālā haʻawina, e ʻike i ka Natural Portfolio Report Abstract pili me kēia ʻatikala.
Ua hāʻawi ʻia ka ʻikepili proteomic mass spectrometry i ka consortium ProteomeXchange ma o ka waihona hoahana PRIDE66 me ka ʻike helu PXD046004. Hōʻike ʻia nā ʻikepili ʻē aʻe a pau i loaʻa ma kēia noiʻi ʻana i ka ʻikepili hou, nā faila ʻikepili hou, a me nā faila ʻike maka. Hāʻawi ʻia ka ʻikepili kumu no kēia ʻatikala.