Hoʻoulu ka Phosphorylation i ka mea hoʻoponopono ulu nui ʻo DELLA ma Arabidopsis ma ka hoʻolaha ʻana i ka pilina o ka histone H2A me ka chromatin.

Ua mālama ʻia nā protein DELLAnā mea hoʻoponopono ulue pāʻani ana i kahi kuleana koʻikoʻi i ka hoʻomalu ʻana i ka ulu ʻana o nā mea kanu ma ke ʻano he pane i nā hōʻailona kūloko a me ke kaiapuni. Hana ʻo DELLA ma ke ʻano he mea hoʻoponopono transcriptional a ua hoʻolimalima ʻia e hoʻopaʻa i nā mea hoʻolaha ma o ka hoʻopaʻa ʻana i nā mea hoʻololi transcription (TFs) a me ka histone H2A ma o kāna kikowaena GRAS. Ua hōʻike ʻia nā haʻawina hou e hoʻoponopono ʻia ka paʻa o DELLA ma hope o ka unuhi ʻana ma o ʻelua mau ʻano hana: polyubiquitination i hoʻokumu ʻia e ka phytohormone gibberellin, kahi e alakaʻi ai i kona hoʻohaʻahaʻa wikiwiki ʻana, a me ka conjugation o nā mea hoʻololi ubiquitin-like liʻiliʻi (SUMO) e hoʻonui i kona hōʻiliʻili ʻana. Eia kekahi, hoʻoponopono ʻia ka hana DELLA e ʻelua mau glycosylations like ʻole: hoʻonui ʻia ka pilina DELLA-TF e O-fucosylation akā ua kāohi ʻia e ka hoʻololi ʻana o O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc). Eia nō naʻe, ʻaʻole maopopo ke kuleana o ka phosphorylation DELLA, ʻoiai ua hōʻike nā haʻawina mua i nā hopena kūʻē, mai nā mea e hōʻike ana e hoʻolaha a hōʻemi paha ka phosphorylation i ka hoʻohaʻahaʻa ʻana o DELLA i nā poʻe ʻē aʻe e hōʻike ana ʻaʻole pili ka phosphorylation i kona paʻa. Maanei, ʻike mākou i nā wahi phosphorylation ma REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) i hoʻomaʻemaʻe ʻia mai Arabidopsis thaliana e ka loiloi spectrometry mass a hōʻike i ka phosphorylation o ʻelua mau peptides RGA ma nā ʻāpana PolyS a me PolyS/T e hoʻolaha i ka hoʻopaʻa ʻana o H2A a hoʻonui i ka hana RGA. ʻO ka hui pū ʻana o RGA me nā mea hoʻolaha pahuhopu. ʻIke ʻia, ʻaʻole pili ka phosphorylation i nā pilina RGA-TF a i ʻole ke kūpaʻa RGA. Hōʻike kā mākou haʻawina i ke ʻano molekala e hoʻoulu ai ka phosphorylation i ka hana DELLA.
No ka hoʻomālamalama ʻana i ke kuleana o ka phosphorylation i ka hoʻoponopono ʻana i ka hana DELLA, he mea nui e ʻike i nā wahi phosphorylation DELLA i loko o ke kino a hana i nā loiloi hana i nā mea kanu. Ma o ka hoʻomaʻemaʻe ʻana o ka affinity o nā mea kanu i ukali ʻia e ka loiloi MS/MS, ua ʻike mākou i kekahi mau phosphosites ma RGA. Ma lalo o nā kūlana o ka hemahema o GA, hoʻonui ka phosphorylation RHA, akā ʻaʻole pili ka phosphorylation i kona kūpaʻa. ʻO ka mea nui, ua hōʻike nā hoʻāʻo co-IP a me ChIP-qPCR e hoʻolaha ka phosphorylation ma ka ʻāpana PolyS/T o RGA i kāna launa pū ʻana me H2A a me kona pilina me nā mea hoʻolaha pahuhopu, e hōʻike ana i ke ʻano hana e hoʻoulu ai ka phosphorylation i ka hana RGA.
Hoʻolimalima ʻia ʻo RGA e hoʻopili i ka chromatin ma o ka launa pū ʻana o ka subdomain LHR1 me TF a laila hoʻopaʻa iā H2A ma o kona ʻāpana PolyS/T a me ka subdomain PFYRE, e hana ana i ka hui H2A-RGA-TF e hoʻopaʻa iā RGA. Hoʻonui ka phosphorylation o Pep 2 ma ka ʻāpana PolyS/T ma waena o ka DELLA domain a me ka GRAS domain e kahi kinase i ʻike ʻole ʻia i ka nakinaki ʻana o RGA-H2A. Hoʻopau ka protein mutant rgam2A i ka phosphorylation RGA a hoʻohana i kahi ʻano protein ʻokoʻa e hoʻopilikia i ka nakinaki ʻana o H2A. ʻO kēia ka hopena i ka destabilization o nā pilina TF-rgam2A transient a me ka dissociation o rgam2A mai ka chromatin target. Hōʻike wale kēia kiʻi i ka hoʻopaʻi transcriptional i hoʻopili ʻia e RGA. Hiki ke wehewehe ʻia kahi ʻano like no ka hoʻāla transcriptional i hoʻopili ʻia e RGA, koe wale nō ka mea e hoʻolaha ka hui H2A-RGA-TF i ka transcription gene target a me ka dephosphorylation o rgam2A e hoʻemi i ka transcription. Hoʻololi ʻia ke kiʻi mai Huang et al.21.
Ua kālailai ʻia nā ʻikepili helu āpau me ka hoʻohana ʻana iā Excel, a ua hoʻoholo ʻia nā ʻokoʻa koʻikoʻi me ka hoʻohana ʻana i ka hoʻāʻo t a Student. ʻAʻohe ʻano helu i hoʻohana ʻia e hoʻoholo mua i ka nui o ka laʻana. ʻAʻohe ʻikepili i kāpae ʻia mai ka loiloi; ʻaʻole i hoʻokaʻawale ʻia ka hoʻokolohua; ʻaʻole makapō nā mea noiʻi i ka hoʻolaha ʻana o ka ʻikepili i ka wā o ka hoʻokolohua a me ka loiloi ʻana i nā hopena. Hōʻike ʻia ka nui o ka laʻana ma ka moʻolelo kiʻi a me ka faila ʻikepili kumu.
No ka ʻike hou aku e pili ana i ka hoʻolālā haʻawina, e ʻike i ka Natural Portfolio Report Abstract e pili ana me kēia ʻatikala.
Ua hāʻawi ʻia nā ʻikepili proteomics mass spectrometry i ka hui ProteomeXchange ma o ka waihona hoa PRIDE66 me ka mea hōʻike ʻikepili PXD046004. Hōʻike ʻia nā ʻikepili ʻē aʻe a pau i loaʻa i ka wā o kēia noiʻi ma ka ʻIke Hoʻohui, nā Waihona ʻIkepili Hoʻohui, a me nā Waihona ʻIkepili Maka. Hāʻawi ʻia ka ʻikepili kumu no kēia ʻatikala.